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除去血中干擾物質(zhì)的前處理方法

發(fā)布時間: 2022-12-05  點擊次數(shù): 1144次

一般來說由于血液的組成比較復雜,其中的許多物質(zhì)尤其是高等動物的血漿或血清對TALLAL試劑與內(nèi)毒素反應很強的干擾作用。因此當我們對這類樣品的內(nèi)毒素進行測定時,必須將其中的干擾物質(zhì)除去后方可進行檢測。

 

目前作為血漿中的干擾物質(zhì)主要有各種蛋白酶抑制劑、內(nèi)毒素結(jié)合蛋白以及纖溶酶原抑制劑等物質(zhì),對于比色法由于Xa因子能分解 Boc-LEU-Gly-Arg-PNA 肽鏈。因此在測定前排除這些干擾物是十分必要的。

除去血中干擾物質(zhì)的前處理方法主要有以下幾種,現(xiàn)分別介紹如下

 

1稀釋加熱法血漿用溶解水進行3~10倍稀釋然后在37 ~ 100℃水中進行加熱處理。保溫時間一般在5~10分鐘

2氯仿提取法血漿加等量的氯仿振動3小時,然后取上層進行檢測

3)乙-醚處理法血漿加入乙-醚處理并在40℃保溫將乙-醚去除;

4三氟代乙酸法血漿中加入乙酸調(diào)節(jié)pH4.0后用K2HPO4調(diào)節(jié)pH7~7.5

5表面活性劑處理法同稀釋加熱法一樣,只是將稀釋用水改為表面活性劑

6凝膠過濾法;

7堿性處理法血漿用0.2NNaOH37℃保溫10分鐘后用HCl中和;

8高氯酸法PCA或新高氯酸法New PCA);

9Beads將吸附內(nèi)毒素的特殊樹脂放入血漿中,取出后,加入LAL試劑進行反應。

 

 

在這些方法中,常用的主要有氯仿提取法、稀釋加熱法以及高氯酸PCA法和新高氯酸New PCA,其中前兩種方法由于內(nèi)毒素回收率﹑假陽性等問題的存在,因此在測定時需要探討,PCANew PCA,由于添加內(nèi)毒素的回收率好,目前在日本主要用于臨床前處理。

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