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凝膠法中玻片法的創(chuàng)立及改進(jìn)過(guò)程

發(fā)布時(shí)間: 2022-10-21  點(diǎn)擊次數(shù): 573次

在凝膠法中,由于試管法的使用會(huì)消耗大量的鱟試劑,以及在試驗(yàn)時(shí)使用的時(shí)間較長(zhǎng)、對(duì)試驗(yàn)結(jié)果判定難以標(biāo)準(zhǔn)化的問(wèn)題。在1974年的時(shí)候,有個(gè)叫Frauch的科學(xué)家首先創(chuàng)立了玻片法。


那玻片法的使用方法到底是怎么樣的呢?


在Frauch的介紹中說(shuō)到,首先需要取出10μl的鱟試劑和在試驗(yàn)前就已經(jīng)處理過(guò)的供試品10μl,均滴在無(wú)菌無(wú)熱原的玻片上,接著將這兩者充分混勻,再在37℃的環(huán)境中靜置30分鐘,最后取出觀(guān)察試驗(yàn)結(jié)果。若發(fā)現(xiàn)被檢樣品中含有內(nèi)毒素,混合物就會(huì)形成凝膠,且把載玻片倒置時(shí)混合物不會(huì)流動(dòng)并且摸起來(lái)很牢固。相反,若被檢樣品不含內(nèi)毒素或者內(nèi)毒素含量較低,混合物就不會(huì)形成凝膠,且混合物還會(huì)呈流動(dòng)狀,



到了1977年的時(shí)候,Goto等科學(xué)家又對(duì)玻片法進(jìn)行了兩點(diǎn)改進(jìn)。


第一點(diǎn),對(duì)鱟試劑以及供試品的使用量均增加到20μl。之所以要增加量,是因?yàn)镚oto等人發(fā)現(xiàn)Frauch的玻片法在對(duì)鱟試劑以及供試品的使用量中僅僅使用10μl,由于量太少的原因,在試驗(yàn)中就會(huì)發(fā)現(xiàn),若是被檢樣品能形成凝膠,但是被檢樣品的體積就會(huì)變得更小了,更加難以對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行判斷結(jié)果。所以將鱟試劑以及被檢樣品的使用含量增至一倍,這樣的話(huà),試驗(yàn)結(jié)果的判定就會(huì)更加容易,準(zhǔn)確度也會(huì)更高。


第二點(diǎn),就是不再使用含有硅含量的玻片進(jìn)行試驗(yàn)。因?yàn)槭褂煤泄韬康牟Aе瞥傻牟F?,在試?yàn)中將鱟試劑及供試品滴在上面,會(huì)使這兩者的液體向四周擴(kuò)散,顯得非常不規(guī)律,在觀(guān)察試驗(yàn)結(jié)果時(shí),就會(huì)難以判斷試驗(yàn)結(jié)果。但是若是使用含有硅含量的玻璃制成的玻片進(jìn)行試驗(yàn),滴在上面的鱟試劑以及供試品就會(huì)顯得非常穩(wěn)定,不會(huì)向四周擴(kuò)散,這樣的話(huà),對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的判斷也會(huì)更容易些。


總而言之,凝膠法中的玻片法,也是一個(gè)檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素的好方法。


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