藥物作為終產(chǎn)物進(jìn)行內(nèi)毒素LT法檢測(cè)是極為適宜的。
美國(guó)FDA已將LT法作為法定的藥物內(nèi)毒素的檢測(cè)方法。檢測(cè)時(shí),應(yīng)用的鱟試劑其敏感性不得低于0.2EU/mL。并應(yīng)考慮藥物中內(nèi)毒素的耐受限-量(Tolerance limit,其值等于每mg或每ml產(chǎn)物中內(nèi)毒素的允許量)。
如果一種藥品未曾通過(guò)LT法(鱟試驗(yàn)法,Limulus test),但卻通過(guò)了RT法(家兔熱原試驗(yàn),Rabbit pyrogen test),則這種藥物亦不能出廠(chǎng),除非此種RT法由官-方進(jìn)行。有一些藥物,特別是已知有抑制或增強(qiáng)LT反應(yīng)的藥物必須作抑制/增強(qiáng)試驗(yàn)。
應(yīng)用LT法檢測(cè)抗生素中內(nèi)毒素的含量是很適宜的。大多數(shù)常用的抗生素如林可霉素、氯霉素、慶大霉素、雙氫鏈霉素、乳酸鹽紅霉素等并不抑制LT反應(yīng),故可直接進(jìn)行測(cè)定。但亦有一些抗生素溶液能抑制LT反應(yīng),故必須進(jìn)行抑制試驗(yàn)。可用足量的無(wú)熱原水進(jìn)行稀釋?zhuān)敝劣迷摽股夭荒芤种?/span>LT凝膠作用的最高濃度進(jìn)行試驗(yàn),所以采用的鱟試劑的敏感度必須等于或超過(guò)藥典規(guī)定的熱原試驗(yàn)的敏感度。
這些能抑制LT反應(yīng)的藥物中最典型的是青霉素類(lèi)藥物,其抑制機(jī)理目前尚不清楚。有人認(rèn)為青霉素的抑制作用是因其對(duì)細(xì)菌細(xì)胞壁所含的酶起作用之故;另有人認(rèn)為青霉素對(duì)LT凝膠形成的抑制作用與它們的血清蛋白結(jié)合率有顯著的相關(guān)、(p<0.01)。如BRL1071青霉素的血清蛋白結(jié)合率最高,它對(duì)LT反應(yīng)的抑制作用亦最-強(qiáng),1.5mmol即能起抑制作用。鹽酸四環(huán)素對(duì)LT反應(yīng)亦有抑制作用,其抑制機(jī)理是由于抗生素溶液pH過(guò)低(≈4)的緣故。
用LT法測(cè)定抗生素中內(nèi)毒素含量比RT法敏感10~100倍。
腫瘤化學(xué)療劑的副反應(yīng)較多,有些與應(yīng)用內(nèi)毒素后相似。因此其不良反應(yīng)可能是由于內(nèi)毒素的污染所致。左旋門(mén)冬酰胺酶是由大腸桿菌或歐氏(Erwinia)植病桿菌制備的,由大腸桿菌制備的門(mén)冬酰胺酶每1000單位含內(nèi)毒素超過(guò)1ng,由歐氏桿菌制備的酶中亦發(fā)現(xiàn)有微量的內(nèi)毒素。另外,博萊霉素,柔紅霉素、長(zhǎng)春新堿等藥品,亦有少量的內(nèi)毒素存在,--般為0.1~5ng/ m1。因此,必須對(duì)抗腫瘤半成品、成品及加工過(guò)程進(jìn)行內(nèi)毒素的檢測(cè),使藥物中的內(nèi)毒素含量控制在安全水平以下,以減少不良反應(yīng)。
有些抗腫瘤藥有細(xì)胞毒性,不宜采用RT法,因此LT法用于抗腫瘤藥物中內(nèi)毒素的檢測(cè)是可行和適宜的。試管法仍為最-實(shí)用的方法。